Ho na le bahale ba bangata ba sa binoang ba re potileng, ba bonahalang ba tloaelehile, empa ha e le hantle ba kenya letsoho haholo ka khutso ho rona. Proteinase K ke "mohale ea sa binoang" indastering ea tlhahlobo ea limolek'hule, leha e bapisoa le "e kholo le e matla" indastering, proteinase K e tlase hoo re seng re hlokomolohile bohlokoa ba eona nako e telele. Ka ho qhoma ha seoa se secha sa moqhaka, tlhoko ea proteinase K e eketsehile, 'me phepelo lapeng le kantle ho naha e se e le morao haholo ho feta tšebeliso, 'me bohle ba ile ba hlokomela ka tšohanyetso hore proteinase K e bohlokoa haholo.
Tšebeliso ea protheine K ke efe?
Proteinase K ke serine protease e nang le ts'ebetso ea enzyme ea proteolytic mme e ka boloka ts'ebetso libakeng tse fapaneng (pH (4-12.5), buffer e nang le letsoai le phahameng, mocheso o phahameng oa 70°C, jj.). Ho phaella moo, ts'ebetso ea proteinase K ha e thibeloe ke SDS, urea, EDTA, guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, jj., 'me sesepa se itseng se ka boela sa ntlafatsa ts'ebetso ea proteinase K. Kalafong ea bongaka (vaerase le likokoana-hloko), lijo (ho nolofatsa nama), letlalo (ho nolofatsa moriri), ho etsa veine (ho hlakisa joala), ho lokisa amino acid (masiba a senyehileng), ho ntša nucleic acid, ho kopanya in situ, jj., proteinase K Ho na le ts'ebeliso. Ts'ebeliso e sebelisoang haholo ke nucleic acid extraction.
Proteinase K e ka etsa enzymolyze mefuta eohle ea liprotheine tse sampole, ho kenyeletsoa le li-histone tse tlamiloeng ka thata ho li-nucleic acid, e le hore li-nucleic acid li ka lokolloa sampoleng 'me tsa lokolloa ka har'a qotsulo, e leng se nolofalletsang mohato o latelang oa ho ntša le ho hloekisa. Ha ho fumanoa viral nucleic acid, proteinase K ke e 'ngoe ea likarolo tsa bohlokoa tharollong ea ho nka sampuli ea vaerase. Proteinase K e ka petsoha le ho tima protheine e kobehileng ea vaerase, e leng se sireletsehileng nakong ea ho tsamaisoa le ho fumanoa ha eona; ho phaella moo, proteinase K e ka boela ea senya RNase.
Botumo ba bosiu ba proteinase K
Ebang ke lefapheng la dipatlisiso tsa mahlale kapa lefapheng la IVD, ho ntshwa ha nucleic acid ke teko ya motheo ka ho fetisisa, kahoo proteinase K esale e le ntho ya bohlokwa haholo. Leha ho le jwalo, nakong e fetileng, proteinase K e ne e sa tsejwe haholo ho feta karolo ya yona. Karolo e kgolo ya sena e ne e le hobane kamano ya phepelo le tlhokeho ya proteinase K e ne e tsitsitse haholo. Batho ba fokolang ba ka nahana hore phepelo ya proteinase K e tla ba bothata.
Ka ho qhoma ha seoa se secha sa moqhaka, tlhoko ea liteko tsa nucleic acid e eketsehile. Ho tloha bofelong ba Phuptjane 2020, Chaena e phethile liteko tse ncha tsa moqhaka tse ka bang limilione tse 90, 'me palo ena e tšosa le ho feta lefatšeng ka bophara. Litekong tsa ho ntša nucleic acid, mahloriso a sebetsang a proteinase K a ka ba 50-200 μg/mL. Ka kakaretso, ho hlokahala hoo e ka bang 100 μg ea proteinase K ho ntša sampole ea nucleic acid. Tšebelisong ea 'nete, e le ho eketsa katleho ea ho ntša nucleic acid, hangata Proteinase K e tla sebelisoa ka bongata bo eketsehileng. Ho lemoha nucleic acid ea coronavirus e ncha ho tlisitse tlhoko e kholo ea proteinase K. Tekanyo ea pele ea phepelo le tlhoko ea proteinase K e ile ea robeha kapele, 'me proteinase K ea fetoha thepa ea bohlokoa ea thibelo ea seoa bosiu bo le bong.
Mathata tlhahisong ea protheine K
Leha ka lebaka la ntshetsopele ya sewa sena, boleng ba bohlokwa ba proteinase K bo ntse bo ananelwa ke batho, ho a swabisa hore ka lebaka la proteinase K e ngata haholo, dikhamphani tse mmalwa tsa lapeng di kentse letsoho tlhahisong ya proteinase K. Ha batho ba batla ho theha tlhahiso ya proteinase K Nakong ya tshebetso ya tlhahiso, ho ile ha sibollwa hore proteinase K ke protheine e ikgethang haholo. Ho thata haholo ho atolosa bokgoni ba tlhahiso ya proteinase K ka nako e kgutshwane.
Tlhahiso e kholo ea proteinase K e tobane le mathata a latelang.
1. Ponahalo e tlase
Proteinase K e ka senya protheine e ngata ka tsela e sa tobang mme ya baka chefo e kgolo ho sele ya moamoheli wa tlhahiso. Ka hona, boemo ba tlhahiso ya proteinase K ka kakaretso bo tlase haholo. Ho hlahlojwa ha ditsamaiso tsa tlhahiso le mefuta e hlahisang proteinase K haholo ka kakaretso ho hloka potoloho e telele.
2. Masalla a di-pigment le di-nucleic acid
Ho belisoa ka bongata ho hlahisa palo e kholo ea masala a pigment le nucleic acid a moamoheli. Ho thata ho tlosa litšila tsena ka mokhoa o bonolo oa ho hloekisa, 'me tlhoekiso e rarahaneng e eketsa litšenyehelo le ho fokotsa sekhahla sa ho hlaphoheloa.
3. Ho se tsitse
Proteinase K ha e tsitse ka ho lekaneng, e ka iketsetsa enzyme, 'me ho thata ho e boloka e tsitsitse mochesong oa 37°C nako e telele ntle le setšireletso.
4. Ho bonolo ho e thiba
Ha ho lokiswa phofo e omisitsoeng ka ho hatsetsa ya proteinase K, e le ho netefatsa hore dikahare tse tiileng tsa proteinase K ka hara phofo e omisitsoeng ka ho hatsetsa di kgolo, ho hlokahala ho eketsa moemedi ya sireletsang e omisitsweng ka ho hatsetsa ka tekanyo e hodimo, empa ha kgatello ya proteinase K e fihla ho 20mg/mL le ho feta, ho bonolo ho kopanya ho etsa hore ho be le ho omella ho hoholo, e leng se tlisang mathata a maholo ho ho omisa ha proteinase K ka tekanyo e hodimo e tiileng.
5. Matsete a maholo
Proteinase K e na le ts'ebetso e matla ea protease 'me e ka hydrolyze liprotheine tse ling laboratoring. Ka hona, proteinase K e hloka libaka tse khethehileng tsa tlhahiso, lisebelisoa le basebetsi bakeng sa lipatlisiso le nts'etsopele le tlhahiso.
Tharollo ea protheine ea K ea XD BIOCHEM
XD BIOCHEM e na le sethala sa tlhahiso le tlhoekiso ea protheine e hōlileng tsebong, 'me e na le boiphihlelo bo bongata tlhahisong le tlhoekisong ea liprotheine tse kopantsoeng le ntlafatso ea lits'ebetso tsa tlhahiso. Ka ho thehoa ka potlako ha sehlopha sa lipatlisiso le nts'etsopele, ts'ebetso e kholo ea tlhahiso ea proteinase K e hlōtsoe. Tlhahiso ea khoeli le khoeli ea phofo e omisitsoeng e hatselitsoeng e feta 30 KG. Sehlahisoa se na le ts'ebetso e tsitsitseng, ts'ebetso e phahameng ea enzyme, 'me ha se na li-residue tsa cytochrome le nucleic acid tse amohelang. Rea u amohela ho ikopanya le XD BIOCHEM Fumana sephutheloana sa teko (Imeile:sales@xdbiochem.comMohala: +86 513 81163739).
Litharollo tsa botekgeniki tsa XD BIOCHEM li kenyelletsa
Ka ho sebedisa kopanyo ya plasmid ya dikopi tse ngata, mefuta ya tlhahiso e phahameng e nang le boemo ba tlhahiso ya 8g/L e a kgethwa, e leng se hlolang bothata ba boemo bo tlase ba tlhahiso ya proteinase K.
Ka ho theha mokhoa oa ho hloekisa ka mehato e mengata, masala a cytochrome le nucleic acid a proteinase K a ile a tlosoa ka katleho ka tlase ho boleng bo tloaelehileng.
Ka tlhahlobo e phahameng ea mekhoa ea tšireletso ea buffer, buffer e ka bolokang protheine K ka mokhoa o tsitsitseng mochesong oa 37°C e khethiloe.
Li-buffer tsa tlhahlobo li rarolla bothata ba hore proteinase K e bonolo ho e kopanya le ho e pompa ka bongata bo phahameng, 'me e rala motheo oa ho omisa ka ho hatsetsa ha proteinase K ka lebaka la ho ba le dikahare tse tiileng tse ngata.
Sampole ea protheine ea XD BIOCHEM K
Teko ea botsitso ea protheine ea K ea XD BIOCHEM: ho ke ke ha e-ba le phetoho e kholo ts'ebetsong kamora matsatsi a 80 mochesong oa kamore
Teko ea botsitso ea XD BIOCHEM proteinase K: ho ke ke ha e-ba le phetoho e kholo ts'ebetsong kamora matsatsi a 80 mochesong oa kamore.
Papiso ea phello ea ho ntša nucleic acid ea XD BIOCHEM proteinase K le lihlahisoa tse qothisanang lehlokoa. Ts'ebetsong ea ho ntša nucleic acid, XD BIOCHEM le tlhōlisano ea proteinase K lia sebelisoa ka ho latellana. Bokhoni ba ho ntša XD BIOCHEM proteinase K bo phahame 'me boleng ba Ct ba gene e reriloeng bo tlase.
Nako ea poso: Tshitwe-31-2021